Endotoxine und Pyrogene (E-Book) von Michael Rieth

Vorwort IX

1 Historisches zu Pyrogenen und Endotoxinen1

1.1 Chronologie ab 19. Jahrhundert 2

1.2 Fieber 5

1.3 Pyrogene 5

1.4 Endotoxine, Exotoxine und Enterotoxine 5

Literatur 9

2 Nachweis von fiebererzeugenden Substanzen11

2.1 Neun Augen, zehn Beine, zwolf Zangen: ein Schwertschwanz 20

2.2 Tests auf Endotoxine 24

Literatur 27

3 Prüfung auf Pyrogene (Ph. Eur. 2.6.8)29

Literatur 34

4 Prüfung auf Bakterienendotoxine (Ph. Eur. 2.6.14 und 5.1.10)35

4.1 Rekonstitution des Lysats 35

4.2 Referenzstandards 35

4.3 Kontrollen wahrend des Tests 38

4.4 Bestatigung der Lysatempfindlichkeit durch das Labor 38

4.5 Prufung eines Produkts 38

4.5.1 Limittest (Methode A) 38

4.5.2 Quantitativer Test (Methode B) 39

4.5.3 Turbidimetrischer Test 40

4.5.4 Chromogener Test 42

4.6 Eliminierung von Storfaktoren und Interferenzen 44

4.7 BET mit oligen Substanzen 51

Literatur 53

5 Alternative Verfahren55

5.1 Prufung auf Monozytenaktivierung (Ph. Eur. 2.6.30) 56

5.2 Monocyte-activation test for vaccines containing inherently pyrogenic components 59

5.3 Bakterieller Endotoxintest mit rFC (Ph. Eur. 2.6.32) 60

5.4 Bakterieller Endotoxintestmit drei rekombinanten Enzymen 66

5.5 Weitere Verfahren 68

Literatur 68

6 LER-Effekt (low endotoxin recovery, LER)71

6.1 Entdeckung des LER-Effekts und der Maskierung 71

6.2 Demaskierung 75

Literatur 76

7 Vorkommen und Nachweis von Glucanen77

Literatur 83

8 Probenzug und Probenvorbereitung85

8.1 Schulung zum Musterzug 87

8.2 Probenvorbereitung 88

8.3 Prufung vonWasserproben 88

8.3.1 Wasser zum Verdunnen konzentrierter Hamodialyselosungen 88

8.3.2 Wasser fur Injektionszwecke (WfI) 88

8.3.3 Wasser nach USP 89

8.3.4 LAL ReagentWater (LRW) 90

8.3.5 VE-Wasser 90

8.3.6 Trinkwasser 91

8.3.7 Suswasser 91

8.4 Prufung von Primarpackmitteln 91

8.4.1 Prufung von Stopfen 93

8.4.2 Prufung von Spritzen und Injektionsnadeln 94

8.5 Prufung vonMedizinprodukten 95

Literatur 99

9 Methodenvalidierung101

9.1 Validierung der Prufung auf Bakterienendotoxine 101

9.2 Validierung des bakteriellen Endotoxintestsmit rFC 119

9.3 Validierung der Prufung auf Monozytenaktivierung 121

Literatur 121

10 Eliminierung und Inaktivierung von Endotoxinen123

Literatur 134

11 Ausrüstung135

11.1 Das Pruflabor 135

11.2 Automationsmoglichkeiten 136

11.3 Qualifizierung und Kalibrierung der Messgerate 139

Literatur 144

12 Vorgehensweisen beiOut-of-Specification-Ergebnissen145

12.1 OOS beim BET 147

12.2 OOS beim Pyrogentest 151

Literatur 153

13 Weitere Einsatzgebiete der Prüfung auf Bakterienendotoxine155

13.1 Monitoring des Umfelds 155

13.2 Reinigungsvalidierung 156

13.3 Untersuchung von Biofilmen 157

13.4 Korrelieren Endotoxineinheiten zur Keimzahl gramnegativer Bakterien? 160

Literatur 161

Anhang: Formeln 163

Abkürzungen 165

Weiterführende Literatur 169

Stichwortverzeichnis 181

Diese erste deutschsprachige Übersicht beschreibt praxisnah alle verfügbaren und in der europäischen Pharmakopöe aufgenommenen Nachweisverfahren für bakterielle Endotoxine und andere Pyrogene. Jede Methode wird ausführlich beschrieben und anhand von Praxisbeispielen einschließlich der produktbezogenen Methodenvalidierung präsentiert. Neueste Erkenntnisse zur Maskierung von Endotoxinen und dem LER (low endotoxin recovery)-Effekt sowie neuentwickelte Methoden zur Endotoxinbestimmung mittels rekombinanter Testsysteme werden vorgestellt. Eine Beschreibung der notwendigen Ausrüstung sowie der hauptsächlichen Einsatzgebiete runden dieses Buch ab.

Dr. Michael Rieth leitete zwischen 1999 und 2014 die Biologische Qualitätsprüfung der Merck KGaA in Darmstadt. Nach seiner Promotion am Institut für Mikrobiologie an der Georg-August-Universität zu Göttingen im Jahre 1987 war er zunächst als wissenschaftlicher Assistent am Universitätsklinikum Göttingen und an der Universität Oldenburg tätig. 1988 wechselte er in die pharmazeutische Industrie. Seine Karriere führte ihn über die biosyn Arzneimittel GmbH in Stuttgart, die Nordmark Arzneimittel GmbH in Uetersen und Schering AG in Berlin zu Merck KGaA, wo er zuletzt im Bereich Global Regulatory Affairs arbeitete. Seit 2020 ist er im Ruhestand. Neben der Mitarbeit in zahlreichen Fachausschüssen ist er in der Fort- und Weiterbildung auf dem Gebiet der pharmazeutischen Mikrobiologie aktiv.
Für sein 2012 erschienenes Buch "Pharmazeutische Mikrobiologie" wurde er 2013 mit dem Wallhäußer-Preis ausgezeichnet. 2016 veröffentlichte Dr. Rieth zusammen mit Dr. Norbert Krämer das Fachbuch "Hygiene in der Arzneimittelproduktion".